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实验原理:试剂盒采用双抗体二步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人(LH)捕获抗体包被微孔中,依次加入标本、标准品孵育,加入生物化抗体进行抗体生物su化,经过温育并后加入HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人(LH)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
检测前准备工作:
1. 请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温。
2. 从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象;放置室温,轻摇均匀,待结晶溶解后再配置洗涤液。可将20ml浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水稀释配置成400ml工作浓度的洗涤液,未用完的放回4℃
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
人(LH)酶联免疫吸附测定试剂盒组成:
名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注 |
微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 | 无 |
标准品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 无 |
生物su标记抗体 | 6mL | 3mL | 无 |
样ben稀释液 | 6mL | 3mL | 无 |
检测抗体-HRP | 10mL | 5mL | 无 |
20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
底物A | 6mL | 3mL | 无 |
底物B | 6mL | 3mL | 无 |
终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
说明书 | 1份 | 1份 | 无 |
自封袋 | 1个 | 1个 | 无 |
备注:
1. 96T/48T)打开包装后请及时检查所有物品是否齐全。
2. 标准品浓度依次为:200、100、50、25、12.5、0 mIU/mL
3. 经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过zui大标准品浓度时,可用样ben稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。
人(LH)酶联免疫吸附测定试剂盒等elisa试剂盒产品——上海轩泽康生物有限公司主营ELISA(酶联免疫分析)试剂盒,由具有酶联技术背景和丰富市场经验的人士组成。产品现已涵盖20多个种属,涉及肿瘤、激素、自身免疫、心血管、代谢等十多个领域。我司ELISA检测试剂盒不仅检测指标丰富,还可以根据实验需求定制检测范围,并提供实验外包和免费代测服务。公司与各大高校、研究机构、医院等建立了合作关系,具有良好的市场信誉,我们致力于用合理的价格和优良的服务,能够及时解决和满足客户的去求,为社会创造更多的价值!
请严格按照产品说明书操作,如需产品说明书可直接来电索取或添加客服索取。
常见样本处理及要求:
1.血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置 2 小时 或 4℃过夜,然后 1000×g 离心 20 分钟,取上清即可,或 将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用 EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在 采集后的 30 分钟内于 2-8℃ 1000×g 离心 15 分钟,取上 清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免 反复冻融。
1. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织jian碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
2.细胞培养物上清:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 其它生物标本:1000×g离心20分钟,取上清即可检测。
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