玉米赤霉烯酮试剂盒生产

产品详情：

【产品名称】：鸡玉米赤霉烯酮（ZEN）ELISA检测试剂盒

【产品货号】：XZK-10477

【检测方法】：竞争法

【样本要求】:    样本不能含叠氮钠（NaN3），因为叠氮钠（NaN3）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。

【供货能力】：现货供应（具体需要联系相关客服），可根据客户需求批量定制生产

【特色服务】：免费代测，实验全程技术指导

【产品价格】: （含税含运费,我们全程提供ELISA实验技术指导和ELISA试剂盒免费代测)

样品收集、处理及保存方法：

1.  标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行。

2.  植物萃取液或其它相关样本：请1000 x g离心20分钟，取上清即可检测。花生样本处理方法：样本去壳粉碎，称取5g于100ml具塞三角瓶中，加入25ml 60%甲醇谁溶液和20ml正乙烷振荡10min，滤纸过滤，弃去1/4初滤液，收集其余滤液于125ml分液漏斗中，静置分层后放出下层60%甲醇水提溶液。现提取液2ml，加入2ml超纯水稀释，使提取液甲醇浓度为30%，此为样品代测液。

3.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

试剂盒组成：

注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、2、4、8、16、32 ng/mL

鸡玉米赤霉烯酮（ZEN）ELISA检测试剂盒操作步骤：

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.  设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3.  样本孔先加待测样本10μL，再加样ben稀释液40μL；空白孔不加。

4.  除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的竞争抗原50μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.  弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

结果判断

1.  15分钟内在波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值；

2.  百分结合率计算：设S0管计数为B0，各标准管或样品管计数为B，非特异管计数为NSB，则百分结合率计算公式如下：B/B0=(B－NSB)/(B0－NSB)×100，%

3.  logit计算:各标准点或样品管的logit值计算公式如下:logit=ln(B/B0)/(1－B/B0)

4.  将标准品的OD均值与标准品0点的OD均相除，为标准点的百分结合率，在log-logit坐标纸上绘图。

5.  Log-logit双对数标准曲线：坐标纸上横轴从左至右第yi个1-9表示为第yi个10进位，第二个1-9表示为第二个10进位。第三个1-9表示为第三个10进位。坐标纸纵轴为百分比（1-99），即各标准吸光值的百分结合率。取一条通过各点的直线。要求尽可能多的点在线上，同时剩余的点均匀分布在直线的两边。样品也同样由吸光值计算百分结合率，再从纵轴上的相应结合率找到直线上的点，此点对应的横坐标浓度即为样品的浓度，无须换算。

6.  人工处理：以标准浓度取log值为横坐标，对应的logit值为纵坐标在普通坐标纸上或以标准浓度为横坐标，对应的B/B0为纵坐标在logit-log坐标纸上画出标准曲线（理想化时是一条直线）。根据待测样

品的B/B0可以从坐标纸上查出样品的浓度值。如果使用普通坐标纸，查出的数值应取反对数才是最后的浓度值。

7.  自动处理：使用logit-log或四参数数据处理模式，由电脑自动计算得出结果。

8.  敏感度：0.25 ng/mL