国产EGF试剂盒生产

生长因子的种类众多，主要可分为血小板来源生长因子(PDGF)、表皮生长因子(EGF)、转化生长因子(TGF-oL和TGFl3)、成纤维细胞生长因子（FGF）、类胰岛素生长因子（IGF）、神经生长因子(NGF)、白细胞介素类生长因子(IL—l、IL—ll、IL一lll等)等。表皮生长因子（EGF）是一种由53个氨基酸残基组成的耐热单链低分子多肽。EGF与靶细胞上的EGF受体特异性识别结合后，发生一系列生化反应，最终可促进靶细胞的DNA合成及有丝分裂。EGF无糖基部位，非常稳定，耐热耐酸，广泛存在于体液和多种腺体中，主要由颌下腺、十二指肠合成，在人体的绝大多数体液中均已发现，在乳汁、尿液、精液中的含量特异性地增高，但在血清中的浓度较低。

检测原理：试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被表皮生长因子（EGF）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的表皮生长因子（EGF）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法：

1.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.  血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品：

1.      酶标仪（450nm）

2.      高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.      37℃恒温箱

小鼠表皮生长因子（EGF）ELISA检测试剂盒组成及其配置：（标准品（S0-S5）浓度依次为：0、30、60、120、240、480 pg/mL）

1. 酶联板(Assay plate ):一块(96孔/48孔)。 

2. 标准品(Standard):0.3ml*6管

3. 样ben稀释液(Sample Diluent):1×6ml/瓶

4. 检测抗体-HRP（HRP-Conjugate reagent）:1x 10ml/瓶

5. 终止液(Stop Solution):1×6ml/瓶

6. 底物溶液（Chromogen Solution）:6ml*2瓶。

7. 20x浓缩洗涤液(20X WashSolution):1×25ml/瓶,

8. 说明书（User manual）: 1份

9. 封板膜（Closure plate membrane）:2份

10.自封袋（Sealed bags）：1个

试剂盒性能：

1.  准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。

2.  灵敏度：zui低检测浓度小于1.0 pg/mL。

3.  特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4.  重复性：板内、板间变异系数均小于15%。

5.  贮藏：2-8℃，避光防潮保存。